Indijska životinja. Određivanje indikana u urinu

indijski(kalijeva sol 3-hidroksiindolil sirkanske kiseline) jedan je od krajnjih produkata metabolizma dušika, koji se izlučuje mokraćom.

Obrazovanje

Nastaje u bubrezima iz 3-hidroksiindolilsirhanske kiseline, koja je produkt neutralizacije indola. Potonji ulazi u krv iz debelog crijeva, gdje se formira iz triptofana kao rezultat propadanja proteina. Indol je otrovna tvar. U stanicama jetre indol se najprije oksidira u 3-hidroksiindol - indoksil, a zatim se spaja sa sumpornom kiselinom, stvarajući indoksil sirhansku kiselinu. Kalijeva ili natrijeva sol te kiseline naziva se indikan.

Ljudska fiziologija

Kod zdrave osobe sadržaj indikana u krvi je u rasponu od 1,0-4,7 µmol/l. Količina indikana u urinu dnevno je 5-20 mg. Povećanje razine indikana u krvi iznad 0,140-0,160 mg% naziva se indikanemija, a povećanje razine u mokraći indikanurija. Ako postoji višak indikana, mokraća postaje smeđa. Na temelju količine ove tvari u ljudskom urinu donose se zaključci o intenzitetu procesa raspadanja proteina u debelom crijevu, kao io funkcionalnom stanju jetre.

Povećanje razine indikana u krvi i urinu opaženo je kod pojačanog truljenja u crijevima, dugotrajnog zatvora, crijevne tuberkuloze, dispepsije, tifusa, s gnojnim žarištima u tijelu (apscesi, gnojni bronhitis), kao i kod bolesti jetre. , kronično oštećenje bubrega, čir na želucu, ponekad tijekom trudnoće.

Jetra neutralizira toksične tvari koje dolaze iz debelog crijeva pomoću dva sustava:

o sustav mikrosomalne oksidacije, o sustav konjugacije.

Svrha i bit rada neutralizacijskih sustava je prikriti toksične skupine (npr. OH skupina u fenolu je toksična) i/ili učiniti molekulu hidrofilnom, što olakšava njezino izlučivanje mokraćom i izostanak nakupljanja u živčanom sustavu. i masnog tkiva.

M IKROSOMALNA OKSIDACIJA

Mikrosomalna oksidacija je slijed reakcija u kojima sudjeluju oksigenaze i NADPH, a dovode do uvođenja atoma kisika u sastav nepolarne molekule i pojave hidrofilnosti u njoj.

Reakcije provodi nekoliko enzima koji se nalaze na membranama endoplazmatskog retikuluma (u slučaju in vitro oni se nazivaju mikrosomalne membrane). Enzimi organiziraju kratki lanac koji završava citokromom P450. Citokrom P450 uključuje jedan atom kisika u molekuli supstrata i drugi u molekuli vode.

Oksidacijski supstrat nije nužno strana tvar (ksenobiotik). Prekursori žučnih kiselina i steroidnih hormona te drugi metaboliti također su podložni mikrosomalnoj oksidaciji.

JUGACIJA

Da bi se maskirale toksične skupine i molekula učinila hidrofilnijom, postoji proces konjugacije, tj. njegovo vezanje na vrlo polarni spoj - takvi spojevi su glutation, sumporna, glukuronska, octena kiselina, glicin, glutamin. U stanicama se često nalaze u vezanom stanju, na primjer:

o sumporna kiselina je vezana za 3"-fosfoadenozin-5"-fosfat i stvara fosfoadenozin fosfosulfat (PAPS),

o glukuronska kiselina se spaja s uridil difosfornom kiselinom i tvori uridil difosfoglukuronsku kiselinu (UDPGA),

o Octena kiselina je u obliku acetil-S-CoA.

O NASTANKU ANIMALNIH INDIKANA

Primjer reakcija neutralizacije tvari je pretvorba indola u životinjski indikan. Prvo se indol oksidira uz sudjelovanje citokroma P450 u indoksil, zatim se konjugira sa sumpornom kiselinom u indoksil sulfat, a zatim kalijeva sol - životinjski indikan.

Povećanim unosom indola iz debelog crijeva povećava se stvaranje indikana u jetri, potom ulazi u bubrege i izlučuje se mokraćom. Po koncentraciji životinjskog indikana u mokraći može se procijeniti intenzitet procesa raspadanja proteina u crijevima.

Prikaži sve članove

Pod uvjetom da imate odgovarajuća dopuštenja, moći ćete vidjeti članovi unos na ili u . Klikom na jednu od ovih poveznica doći ćete do Prikaži sve članove stranica, zadana stranica za Popis članova odjeljak. Tu je i a stranici u ovom odjeljku, gdje možete tražiti članove registrirane na forumu.

Na Prikaži sve članove stranici, vidjet ćete popis svih članova registriranih na forumu. Stranice se koriste tako da nema previše članova navedenih na jednoj stranici. Kada postoji više od jedne stranice, dodatne stranice se mogu odabrati odavde. Na desnoj strani naslovne trake "Popis članova" prikazano je svako slovo engleske abecede. Ova slova se koriste za skok na korisnička imena registriranih članova koja počinju tim slovom, tako da ne morate listati kroz nekoliko stranica da biste ih pronašli. Ovo ne filtrira sva korisnička imena koja počinju različitim slovima, već služi kao sidro, tako da ćete biti usmjereni na korisnička imena koja počinju odabranim slovom.

Sva korisnička imena na popisu članova mogu se poredati prema: statusu (online/offline), korisničkom imenu, e-pošti, web stranici, ICQ, AIM, YIM, MSN, poziciji, datumu registracije i objavama. Ovi naslovi stupaca su veze koje se mogu koristiti za sortiranje popisa uzlaznim ili silaznim redoslijedom ili za obrnuti redoslijed sortiranja stupca ispod naslova koji se trenutno koristi za sortiranje popisa.

Potražite članove

Ovaj vam odjeljak omogućuje ili jednostavnu pretragu članova ili odabir filtriranja rezultata korištenjem dodatnih parametara. Članove možete pretraživati ​​na temelju njihovog korisničkog imena, adrese e-pošte, nadimka u messengeru, web stranice ili položaja.

Rezultati pretraživanja pokazat će podudaranja za pojmove koje unesete u polje za pretraživanje. Ako je odabran bilo koji od dodatnih parametara pretraživanja, rezultati će također biti filtrirani u skladu s tim. Pretraživanje ne traži samo točna podudaranja cijele riječi, već i sve dijelove teksta koji odgovaraju pojmovima za pretraživanje. Iz tog razloga, ako pojam za pretraživanje predstavlja samo dio riječi koju tražite, tada rezultati mogu pokazati mnogo više podudaranja od očekivanog.

Neki od dodatnih parametara pretraživanja odnose se na informacije koje korisnici mogu odlučiti ne uključiti u svoj profil (nadimak u messengeru, web mjesto) ili mogu odlučiti da ih ne otkriju javnosti (e-pošta), tako da korištenje ovih parametara možda neće uvijek dovesti do rezultate koje tražite. Rezultati pretrage bit će točniji što se više slova/riječi koristi u pretrazi.

Indikan je kalijeva ili natrijeva sol indoksil sumporne kiseline, nastala u jetri tijekom neutralizacije indola. Indol se pak stvara u crijevima iz triptofana tijekom raspadanja proteina.

U urinu zdrave osobe indikan se nalazi u malim količinama i ne može se otkriti konvencionalnim laboratorijskim pretragama.

Obermeyerov test

Princip metode. Kao rezultat hidrolize esterske veze s jakom kiselinom, indikan se pretvara u indoksil, koji se oksidacijom željeznim (III) kloridom pretvara u indigo plavo.

Reagensi. 1) olovo acetat, otopina 100 g/l; 2) koncentrirana solna kiselina relativne gustoće 1,19; 3) željezni klorid (FeCl 3 × 6H 2 O); 4) Obermeyerov reagens: 0,4 g FeCl 3 × 6H 2 O otopi se u 100 ml koncentrirane klorovodične kiseline; 5) kloroform; 6) natrijev tiosulfat (Na 2 S 2 O 3 × 5H 2 O), otopina 200 g/l.

Napredak odlučnosti. U epruvetu se doda 4 ml urina, doda se 0,4 ml otopine olovnog acetata za taloženje žučnih pigmenata, soli i drugih tvari koje ometaju reakciju. Filtrirano. 1-2 ml filtrata pomiješa se s jednakim volumenom Obermeyerovog reagensa i nakon 5 minuta doda se 0,5-1 ml kloroforma, epruveta se zatvori i sadržaj pažljivo promiješa, okrećući epruvetu nekoliko puta. Ako sloj kloroforma postane plav ili crven, isisati ga i dodati mu 2-3 kapi otopine natrijevog tiosulfata.

Evaluacija rezultata. Nakon dodavanja otopine natrijevog tiosulfata boja ne nestaje – uzorak je pozitivan.

Jaffe uzorak

Princip metode. Kao rezultat hidrolize esterske veze s jakom anorganskom kiselinom, indikan se pretvara u indoksil, koji se oksidacijom kalijevim permanganatom pretvara u indigo plavo.

Reagensi: 1) 2% otopina kalijevog permanganata (KMnO 4): 2 g permanganata otopi se u 98 ml destilirane vode; 2) koncentrirana solna kiselina; 3) kloroform (CHCl3); 4) natrijev tiosulfat (Na 2 S 2 O 3 × 5H 2 O) kristalan.

Napredak odlučnosti. 5-6 ml filtriranog urina oslobođenog od bjelančevina ulije se u kemijsku epruvetu, doda jednak volumen koncentrirane klorovodične kiseline i 2-3 ml kloroforma. U sadržaj epruvete kap po kap (!) dodaje se 2% otopina kalijevog permanganata (višak permanganata dovodi do oksidacije indiga u žuti izatin). Epruveta se začepi i sadržaj pažljivo promiješa uz višestruko preokretanje (15-20 puta). Snažno mućkanje može stvoriti stabilnu emulziju koja sprječava razdvajanje tekućine u slojeve. Epruveta se postavi u stalak i nakon nekoliko minuta se mjeri reakcija prema boji sloja kloroforma koji se nalazi na dnu.

Evaluacija rezultata. Kada je indikan prisutan u mokraći, kloroform postaje ljubičast ili plav. Ako nema dovoljno dodatka kalijevog permanganata (slaba oksidacija), ili pacijenti uzimaju pripravke joda, sloj kloroforma postaje ružičasto-crven. Obojenost uzrokovana uzimanjem lijekova razlikuje se pomoću tiosulfatnog testa: kada se uzorku dodaju kristali natrijevog tiosulfata, ružičasto-crvena nijansa nestaje, ostaje obojenje ovisno o indigu.

U nekim slučajevima, čak i kod zdravih osoba, kloroform može postati blijedoplav, što se također smatra normalnim.

Klinički značaj. Indican u urinu se otkriva u slučajevima crijevne opstrukcije, spastičnog kolitisa, peritonitisa, kada se stvaraju uvjeti za intenziviranje procesa truljenja u crijevima, kao i kod povećane razgradnje proteina u tijelu.